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104. Jahrestagung der Deutschen Ophthalmologischen Gesellschaft 2006
Abstract
Abstract
SO.14.07 Benetzungsmittel unterscheiden sich im Austrocknungsschutz humaner Epithelzellen Tost F.1, Paulsen K.2, Giebel J.2
1Augenklinik, 2Institut für Anatomie und Zellbiologie, Ernst-Moritz-Arndt-Universität, Greifswald Ziel: Das trockene Auge geht mit Störungen der natürlichen Funktion der kornealen und konjunktivalen Epithelbarriere einher. Mikroveränderungen des Epithels sind aus zytologischen Studien bekannt. Die Applikation von Tränenersatzmitteln soll das Benetzungsdefizit ausgleichen und die Schleimhaut vor Austrocknung schützen. Um diesen Schutzeffekt von Benetzungsmitteln standardisiert bewerten zu können, wurde ein Zellkulturmodell mit humanen Epithelzelllinien etabliert.
Methode: Der Austrocknungsschutz pharmakologischer Substanzen wurde in einem standardisierten Zellkulturtest an humanen Zelllinien konjunktivaler (Chang 1-5c-4 Reihe 1) und kornealer Epithelzellen (2.040 pRSV-T Reihe 2) überprüft. Bei konfluentem Zellwachstum Benetzung mit Artelac® EDO, Vidisic® EDO, Vidisic® Fluid EDO, Acuolens®, Viscofresh, Hyal Drops SDU, PBS als Negativkontrolle, Medium als Positivkontrolle für 20 Min., Austrocknung bei konstantem Luftzug: 0,15,30,45 Min. Inkubation mit Vitalitätsfarbstoff alamarBlue (Biosource). Messung der Absorption der oxidierten Form des Farbstoffes (ELISA-Reader) zur Bestimmung der Frequenz noch vorhandener vitaler Epithelzellen.
Ergebnisse: Die Zellüberlebensraten betrugen in Reihe 1 jeweils nach 0, 15,30,45 Min. für Artelac®EDO (1,02;0,81;0,35;0,32), Vidisic®EDO (0,82;0,69;0,63;0,54), Vidisic® fluid EDO (0,77;0,80;0,67;0,70), Acuolens® (0,76;0,70;0,36; 0,34), Viscofresh (0,97;0,46;0,35;0,33), Hyal Drops (0,88;0,85;0,37; 0,33), PBS (0,71;0,44;0,34;0,33), in Reihe 2 Artelac (1,03;0,84;-0,21;-0,20), Vidisic (0,89;0,92;0,93;0,86), Vidisic fluid (0,96;0,88;0,85;0,85), Acuolens (1,01;0,75;-0,02;-0,03), Viscofresh (0,98;0,17;-0,22;-0,20), Hyal Drops (0,97;0,83;0,03;-0,21), PBS (0,96;0,26;-0,24;-0,21). Mit zunehmender Austrocknungsdauer (30, 45 Min.) kam es bei den meisten Präparaten zum hohen Verlust vitaler Zellen. Zwei Wirksubstanzen zeigten einen signifikant besseren Schutzeffekt. Nach Benetzung mit Vidisic EDO fluid und Vidisic EDO war der Verlust vitaler Epithelzellen am geringsten.
Schlussfolgerungen: Der protektive Effekt pharmakologischer Substanzen, das hochdifferenzierte Epithel der menschlichen Augenoberfläche vor Austrocknung zu schützen, kann im Zellkulturtestverfahren an humanen Epithelzelllinien standardisiert evaluiert werden. Da der eingesetzte Vitalitätsfarbstoff ein positives Redoxpotential aufweist und selbst nicht zytotoxisch wirkt, erreicht das Messverfahren eine gute Reliabilität.
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